一、污染源分析
植物组织培养技术是在人工培养基上完成的,虽然是在人工可控的无菌环境中进行的,但出现污染问题也是不可避免的。污染源主要有支原体、病毒、真菌、细菌以及不同种细胞的污染,其中最常见的是真菌和细菌。导致细菌性污染最主要的原因是,在培养过程中,操作人员使用的接种工具消毒不彻底、在操作过程中的行为不规范、培养材料处理不正确等。细菌性污染导致培养基或马铃薯培养材料的表面产生黏液状杂质或菌落,还有可能出现水渍状混浊或泡沫发酵状,这些污染状况一般在接种的 1~2 d后就可以显现。在由真菌引起的真菌性污染的培养容器内,往往会出现白、黑或绿色的菌丝块,这些污染状况一般在接种的 一周左右就可以显现。其中以曲霉、毛霉和青霉属真菌最常见且扩散快、不易控制,由此可见,霉菌通常是真菌性污染的主要源头。
二、污染防治措施
(1)对培养基和马铃薯组培苗进行部分杀菌消毒,从源头抑制污染的出现,培养基封口后,立即进行高温高压灭菌,防止菌类大量滋生。
(2)在接种过程中须严格遵守操作规范,确保操作技术与流程正确无误,以及对操作工具、设备进行充分彻底的灭菌消毒。基础苗在接种之前应仔细筛选,将已经被污染、存在被污染隐患的基础苗及时清除,使用75%酒精擦拭装有基础苗的容器瓶身及盖口, 并在超净工作台进行紫外灯照射消毒后备用。最后,在马铃薯组培苗的生长发育过程中,需要调控其生长环境, 将各项指标调节至最适合组培苗生长的范围,保证其健壮生长;安装完善的消毒杀菌装置,定期消毒,抑制污染源滋生,使其更有利于马铃薯组培苗的无菌生长。
甘肃山丹马铃薯科技小院
培养单位:甘肃农业大学
联合培养单位:位奇镇人民政府、甘肃荣腾农业科技开发有限责任公司
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一、污染源分析
植物组织培养技术是在人工培养基上完成的,虽然是在人工可控的无菌环境中进行的,但出现污染问题也是不可避免的。污染源主要有支原体、病毒、真菌、细菌以及不同种细胞的污染,其中最常见的是真菌和细菌。导致细菌性污染最主要的原因是,在培养过程中,操作人员使用的接种工具消毒不彻底、在操作过程中的行为不规范、培养材料处理不正确等。细菌性污染导致培养基或马铃薯培养材料的表面产生黏液状杂质或菌落,还有可能出现水渍状混浊或泡沫发酵状,这些污染状况一般在接种的 1~2 d后就可以显现。在由真菌引起的真菌性污染的培养容器内,往往会出现白、黑或绿色的菌丝块,这些污染状况一般在接种的 一周左右就可以显现。其中以曲霉、毛霉和青霉属真菌最常见且扩散快、不易控制,由此可见,霉菌通常是真菌性污染的主要源头。
二、污染防治措施
(1)对培养基和马铃薯组培苗进行部分杀菌消毒,从源头抑制污染的出现,培养基封口后,立即进行高温高压灭菌,防止菌类大量滋生。
(2)在接种过程中须严格遵守操作规范,确保操作技术与流程正确无误,以及对操作工具、设备进行充分彻底的灭菌消毒。基础苗在接种之前应仔细筛选,将已经被污染、存在被污染隐患的基础苗及时清除,使用75%酒精擦拭装有基础苗的容器瓶身及盖口, 并在超净工作台进行紫外灯照射消毒后备用。最后,在马铃薯组培苗的生长发育过程中,需要调控其生长环境, 将各项指标调节至最适合组培苗生长的范围,保证其健壮生长;安装完善的消毒杀菌装置,定期消毒,抑制污染源滋生,使其更有利于马铃薯组培苗的无菌生长。
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