学生部分日志

• 11

  2024年06月
  实验室日志

  菌液PCR:1.实验前试剂准备从LB固体平板中挑取的单菌落，重悬于10uL的LB液体培养基中；Fasttaq酶、引物、去离子水等。2.加样根据Taq酶...
• 12

  2024年06月
  实验室日志

  提取质粒1.将2ml含相应抗生素的LB液体培养基加入到试管中，接入含质粒的大肠杆菌，37℃振荡培养过夜。2.取1.5ml培养物倒入微量离心管中，400...
• 13

  2024年06月
  实验室日志

  农杆菌感受态制备：1、挑取根癌农杆菌单菌落于3ml的YEB液体培养基（含Rif50mg/l）中，28℃振荡培养过夜；2、取过夜培养菌液1ml接种于50...
• 14

  2024年06月
  实验室日志

  农杆菌转化：1、在200µl感受态细胞中加入2－6µl质粒（pBI121）DNA，冰浴5min，液氮中速冻5min；2、迅速转入37℃水浴中，热激5m...
• 15

  2024年06月
  实验室日志

  农杆菌浸润烟草：（1）取自田间栽培烟草植株，用蒸馏水冲洗1遍后，以70%乙醇清洗45s，再以0.1%的升汞消毒6-8min，无菌水冲洗5遍，无菌滤纸吸...
• 16

  2024年06月
  实验室日志

  酵母双杂交原理：许多转录因子都包含两个相互独立的功能结构域，即DNA结合结构域（bindingdomain，BD）和转录活化结构域（activedom...
• 17

  2024年06月
  实验室日志

  酵母感受态制备：(1)将-80℃保存的酵母菌株在YPDA固体培养基平板上划线，30℃培养条件下倒置培养4-7d。(2)挑取单菌落至含3mLYPDA液体...
• 18

  2024年06月
  实验室日志

  酵母感受态转化（1）在干净的1.5mL的离心管中并振荡混匀。（2）每个离心管中加入100µL的酵母感受态细胞，500µL的PEG/LiAc溶液，加入两...
• 19

  2024年06月
  实验室日志

  酵母双杂交互作验证：取过夜培养的菌液涂布于四缺平板上，将培养皿置于30℃恒温培养箱中培养，观察是否生长与颜色变化。
• 20

  2024年06月
  实验室日志

  蛋白样品提取：配置RIPA弱裂解液，并按需加入适量的蛋白酶抑制剂、PMSF、磷酸酶抑制剂等。弃去提取蛋白的细胞的培养基，应用预冷 PBS 洗两次后弃净...