2023.05.12

今天的实验内容是给鳜鱼卵打针，场长和技术员总是对我们的实验很好奇，怎么给卵打针？怎么在那么小的卵上给鳜鱼做实验？

在我的视角里，基因编辑就是对目标基因及其转录产物进行编辑（定向改造），实现特定DNA片段的加入、删除，特定DNA碱基的缺失、替换等，以改变目的基因或调控元件的序列、表达量或功能。

当然跟他们说这种方法原理的时候，没有那么专业。我只能说是利用很细的（0.1至0.5μm）玻璃注射针，给卵细胞打个“孔”，自己设计合成的“药”注射到鳜鱼受精卵里，那个药能在卵内发生作用，将来，孵化出的鳜鱼苗会长的不一样。厂长和技术看看显微镜视角下的鳜鱼卵，看看实验的器材，之后看我们操作，忍不住偷偷议论起来，像是在好奇实验过程中，我设计的药品怎么影响到鳜鱼卵的生长发育。

给鳜鱼卵打针，用的是极细的玻璃显微注射针，有专用的微量上样器，将gRNA：cas9蛋白按照质量比1：8混合后注射进鳜卵的动物极，这个过程中手有一点点抖动在显微镜下都是极其明显的，为此，我做了上千次的练习，摆卵的模具是特别订制的，是一种斜着向下的凹槽，放入鳜鱼卵时能够固定住鱼卵，摆放时将鳜鱼卵的动物极斜向上放入凹槽，之后在显微镜下操作针头，将药品注射进鳜鱼卵的动物极。注射完的消毒很重要，给卵打针，说到底也在鳜鱼卵上留下了伤疤，受伤的卵，孵化率还是会受到影响，将注射过的卵放入亚甲基蓝消毒后，轻轻捞出转入孵化装置。孵化装置要调节进气量，使卵不断被翻滚起来。孵化中，需要不断地观察卵的情况，每4个小时观察卵一次，看看卵是不是健康，看看发育时期是不是正常。拍照记录发育情况。

室外鳜鱼卵的发育要比实验室里的发育速度更快，在夜间温度降低时，室内胚胎发育明显减慢，为此，白天，把实验室的孵化器搬到了室外，夜晚再搬回室内。

做好了一切准备后，时时刻刻都在祈祷，希望每个编辑的胚胎都能正常发育。

2023.05.12

今天的实验内容是给鳜鱼卵打针，场长和技术员总是对我们的实验很好奇，怎么给卵打针？怎么在那么小的卵上给鳜鱼做实验？

在我的视角里，基因编辑就是对目标基因及其转录产物进行编辑（定向改造），实现特定DNA片段的加入、删除，特定DNA碱基的缺失、替换等，以改变目的基因或调控元件的序列、表达量或功能。

当然跟他们说这种方法原理的时候，没有那么专业。我只能说是利用很细的（0.1至0.5μm）玻璃注射针，给卵细胞打个“孔”，自己设计合成的“药”注射到鳜鱼受精卵里，那个药能在卵内发生作用，将来，孵化出的鳜鱼苗会长的不一样。厂长和技术看看显微镜视角下的鳜鱼卵，看看实验的器材，之后看我们操作，忍不住偷偷议论起来，像是在好奇实验过程中，我设计的药品怎么影响到鳜鱼卵的生长发育。

给鳜鱼卵打针，用的是极细的玻璃显微注射针，有专用的微量上样器，将gRNA：cas9蛋白按照质量比1：8混合后注射进鳜卵的动物极，这个过程中手有一点点抖动在显微镜下都是极其明显的，为此，我做了上千次的练习，摆卵的模具是特别订制的，是一种斜着向下的凹槽，放入鳜鱼卵时能够固定住鱼卵，摆放时将鳜鱼卵的动物极斜向上放入凹槽，之后在显微镜下操作针头，将药品注射进鳜鱼卵的动物极。注射完的消毒很重要，给卵打针，说到底也在鳜鱼卵上留下了伤疤，受伤的卵，孵化率还是会受到影响，将注射过的卵放入亚甲基蓝消毒后，轻轻捞出转入孵化装置。孵化装置要调节进气量，使卵不断被翻滚起来。孵化中，需要不断地观察卵的情况，每4个小时观察卵一次，看看卵是不是健康，看看发育时期是不是正常。拍照记录发育情况。

室外鳜鱼卵的发育要比实验室里的发育速度更快，在夜间温度降低时，室内胚胎发育明显减慢，为此，白天，把实验室的孵化器搬到了室外，夜晚再搬回室内。

做好了一切准备后，时时刻刻都在祈祷，希望每个编辑的胚胎都能正常发育。