1 牛冷冻精液样品的处理 

1.1 冷冻牛精液的原理 在低温中储存牛精液后，解冻后的精子可以恢复受精的 能力。但冷冻仍旧会损伤细胞，从而导致一部分精子失活甚 至是死亡。所以,为了保证精子的质量，采集的精液数量一定 要大于需求的精子量。另一方面，精子存贮在液氮的低温环 境下，-196℃的环境会大幅度的抑制精子的活动和新陈代 谢，所以冷冻的环境可以用来保存牛精子。冷冻精子之所以 会在常温下恢复活力，还是取决于冷冻保护剂的加入。 

1.2 冷冻精液的保护 良好的冷冻保护剂，可以使精子不经过水分的结晶这一 步骤。水分在低温环境下会结成冰晶，而冰晶对细胞是有很 大损伤的。冰晶会改变细胞膜的渗透压，两侧的渗透压不同， 细胞会脱水，对精子来说，这是致命的。降温速度越慢，冰晶 越多，所以现在采用的方法都是快速冷却，而复苏时缓慢升 温，以减少对精子细胞的伤害。冷冻精液的保护剂有很多种, 较为广泛应用的冷冻保护剂是甘油, 用卵黄或牛奶稀释牛精 液，稀释到浓度为6%~10%。在用卵黄或者牛奶稀释过的精 液里加入甘油。应当注意的是，添加过程要缓慢加入。过快的 速度会伤害到精子。温度应保持在5℃下，加好后平衡一段时 间，最好过夜,最后用细管分装放置于液氮冷冻封存。 

2 牛冷冻精液的质量检验 

2.1 牛精子的质检内容 根据国家规定，精子的质量检测应包括精子活力、精子 形态、精子浓度、精子存活时间等。精子密度采用密度仪测 定，精子活力通过电视显微装置观察，并且进行评估，畸形率 畜牧兽医科技信息 畜牧兽医科技信息 的测定采用姬姆萨染色法，并计数。测量方法多种多样，并不 局限于这几种，上述只是常规方法以及相关指标的规定。

 2.2 牛精子的质检方法分析 计算机辅助精液分析（CASA）系统是利用计算机辅助精 子运动图像分析仪来检测精子质量。具有操作便捷、直观、快 速、重复性好、准确度高等优点。对有条件的实验室或者生产 厂家可以采用此种方法。也可以采用流式细胞仪，来代替荧 光显微镜染色技术, 流式细胞仪检测精子的质量可以快速呈 现结果而且结果准确和操作简便等，能全面直观的检测待检 项目,能够完全体现精子所处的环境及本身的状态，精子的各 项指标都可以以此体现。

1 牛冷冻精液样品的处理 

1.1 冷冻牛精液的原理 在低温中储存牛精液后，解冻后的精子可以恢复受精的 能力。但冷冻仍旧会损伤细胞，从而导致一部分精子失活甚 至是死亡。所以,为了保证精子的质量，采集的精液数量一定 要大于需求的精子量。另一方面，精子存贮在液氮的低温环 境下，-196℃的环境会大幅度的抑制精子的活动和新陈代 谢，所以冷冻的环境可以用来保存牛精子。冷冻精子之所以 会在常温下恢复活力，还是取决于冷冻保护剂的加入。 

1.2 冷冻精液的保护 良好的冷冻保护剂，可以使精子不经过水分的结晶这一 步骤。水分在低温环境下会结成冰晶，而冰晶对细胞是有很 大损伤的。冰晶会改变细胞膜的渗透压，两侧的渗透压不同， 细胞会脱水，对精子来说，这是致命的。降温速度越慢，冰晶 越多，所以现在采用的方法都是快速冷却，而复苏时缓慢升 温，以减少对精子细胞的伤害。冷冻精液的保护剂有很多种, 较为广泛应用的冷冻保护剂是甘油, 用卵黄或牛奶稀释牛精 液，稀释到浓度为6%~10%。在用卵黄或者牛奶稀释过的精 液里加入甘油。应当注意的是，添加过程要缓慢加入。过快的 速度会伤害到精子。温度应保持在5℃下，加好后平衡一段时 间，最好过夜,最后用细管分装放置于液氮冷冻封存。 

2 牛冷冻精液的质量检验 

2.1 牛精子的质检内容 根据国家规定，精子的质量检测应包括精子活力、精子 形态、精子浓度、精子存活时间等。精子密度采用密度仪测 定，精子活力通过电视显微装置观察，并且进行评估，畸形率 畜牧兽医科技信息 畜牧兽医科技信息 的测定采用姬姆萨染色法，并计数。测量方法多种多样，并不 局限于这几种，上述只是常规方法以及相关指标的规定。

 2.2 牛精子的质检方法分析 计算机辅助精液分析（CASA）系统是利用计算机辅助精 子运动图像分析仪来检测精子质量。具有操作便捷、直观、快 速、重复性好、准确度高等优点。对有条件的实验室或者生产 厂家可以采用此种方法。也可以采用流式细胞仪，来代替荧 光显微镜染色技术, 流式细胞仪检测精子的质量可以快速呈 现结果而且结果准确和操作简便等，能全面直观的检测待检 项目,能够完全体现精子所处的环境及本身的状态，精子的各 项指标都可以以此体现。