学生部分日志

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  2024年07月
  柯赫氏法则

  柯赫氏法则(Kochs·Rule)1.病体患病部位经常可以找到大量的病原体，而在健康活体中找不到这些病原体。（Themicroorganismmust...
• 18

  2024年07月
  农杆菌浸润

  挑取含有目的载体的农杆菌单克隆至含有相应抗生素的5mlLB培养基中，在28°C，200rpm的条件下培养12d。(新鲜转化的农杆菌单克隆在3ml培养基...
• 19

  2024年07月
  RNA提取

  1.将新鲜的叶片快速切碎，并加入TRIzoI试剂。2.彻底混合，使细胞破碎并释放RNA。3.加入氯仿，使混合物分为上层和下层，RNA位于上层。4.将上...
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  2024年07月
  RNA定量

  RNA定量：260nm-核酸吸收峰;280nm-蛋白质吸收峰;230nm-碳水化合物吸收峰2601280:1.8-2.0左右说明RNA纯度较好，低-蛋...
• 21

  2024年07月
  植物组织中总蛋白的提取

  植物组织中总蛋白的提取1.将少量组织块置于1~2m1匀浆器中球状部位,用干净的剪刀将组织块尽量剪碎;2.加400u单去污剂裂解液裂(含PMSF)于匀浆...
• 22

  2024年07月
  蛋白质变性

  蛋白变性按照4:1的比例(80ul:20ul),取适量5x蛋白上样缓冲液(5x蛋白上样缓冲液稀释至1x)和ripa细胞裂解混合液(已加入PMSF)加入...
• 23

  2024年07月
  westernblot之电泳

  WesternBlot法采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE（聚丙烯酰胺凝胶电泳）分离的蛋...
• 24

  2024年07月
  westernblot之转膜

  1.转膜液的配制转膜之前先提前配好1x转膜液，也可以直接购买碧云天配制好的的Western转膜液(P0021A/P0021B)，提前放在4℃冰箱或冷库...
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  2024年07月
  westernblot之孵育

  封闭使用含有5%脱脂奶粉的1xTBS（pH7.4），室温1h，于摇床上进行；一抗孵育在4℃冰箱的摇床上进行，孵育过夜，抗体稀释于含有2%脱脂奶粉的0....
• 26

  2024年07月
  westernblot之显影

  WesternBlot实验的最后一步，是显影。拿到高特异性、低背景的显色图像，这一步至关重要。显色的原理是实验中的二抗被HRP（辣根过氧化物酶）标记，...