学生部分日志

• 03

  2024年08月
  大肠杆菌转化

  1.将100uL感受态细胞(在1.5mL离心管中)置于冰水浴中化冻。待细胞刚化冻后，在超净台加入10uL目的DNA到细胞中并用手指轻弹管底，轻轻混匀。...
• 05

  2024年08月
  农杆菌转化

  将2μL质粒加到农杆菌感受态细胞中，冰上放置5min，液氮处理5min，37℃水浴5min冰上放置5min。加入500μL不含抗生素的LB液体培养基，...
• 07

  2024年08月
  大肠杆菌不同菌株的差别

  DH5α和BL21是两种常用的大肠杆菌（E.coli）菌株，具有不同的特点，主要区别在以下几个方面：1.DH5α菌株适合进行一般的重组DNA实验，如质...
• 09

  2024年08月
  考马斯亮蓝染色

  1.将聚丙烯酰胺凝胶放在塑料容器并以3~5倍体积的固定液覆盖，在旋转摇床中缓慢揺动2h。2.倾去固定液，以考马斯亮蓝染色液覆盖凝胶，并缓慢摇动4h。3...
• 11

  2024年08月
  RNA反转录

  反转录的原理反转录，顾名思义，是一种逆转的过程。它是由RNA为模板通过反转录酶的作用，合成与其互补的DNA链的过程。这一这程首次被发现是在某些逆转录病...
• 13

  2024年08月
  逆转录种类及区别

  逆转录（ReverseTranscription）是分子生物学中常用的实验项目，用于将RNA转录为相应的DNA分子。逆转录是一种重要的技术，可以用于研...
• 15

  2024年08月
  荧光定量原理

  在定量PCR（也称rt-PCR或qPCR）中，荧光信号是由荧光探针或荧光DNA结合染料（如SYBRGreen）产生，其强度与PCR产物分子（扩增子）的...
• 16

  2024年08月
  荧光定量之溶解曲线

  熔解曲线熔解曲线描绘了随着反应温度升高，掺入染料分子的dsDNA解离成单链DNA（ssDNA）时的荧光变化。例如，当结合SYBR™GreenI染料的d...
• 17

  2024年08月
  荧光定量之内参

  内参为了实现对目标基因的精确分析，通常使用管家基因（18s）来优先计算靶基因的相对表达量，以消除不同组别间因总RNA量的不同而形成的目的基因的表达假性...
• 18

  2024年08月
  荧光定量之相对定量

  绝对定量是对未知样品的绝对量（拷贝数）进行测定的方法。而相对定量，并不是测定基因的绝对量，而是分别测定目的基因和参比基因的量，再求出对于参比基因的目的...