大家在打流感疫苗前,经常会听到医生问这样一句话:“你对鸡蛋过敏吗?”这疫苗和鸡蛋有什么关系呢?
疫苗作为人类对抗传染性疾病最有利的武器,它的类型有许多,比如说灭活病毒疫苗、重组病毒载体疫苗等等。鸡蛋,实验室里我们称它为鸡胚,利用鸡胚进行病毒培养就是一种经典的灭活病毒疫苗的生产方式。用于病毒培养的鸡胚,跟市面上用于食用的鸡蛋是不太一样的,它必须是无菌的、完好的、未感染特定病原体的受精鸡胚。
为什么选择鸡胚去进行病毒培养呢?这是因为病毒因其自身特点,必须在活细胞内才能生长和增殖。而鸡胚正处于生长发育阶段,细胞代谢旺盛,对一些常见的病毒很敏感,有利于病毒的培养。今天,我们就以流感病毒培养为例,跟大家聊聊我们在实验室里如何通过鸡胚完成病毒的培养。
第一步:选蛋孵化
实验室在收到鸡胚之后,要将鸡胚放置于孵化器中进行孵化,一般孵化9~11天。在整个孵化过程中,要对鸡胚进行观察,弃去死胚、没有受精、有裂痕、发育不全或表面有好多渗水孔的鸡胚,留下血管清晰可见、胎体运动明显的受精鸡胚。
第二步:接种病毒
将符合接种条件的鸡胚气室朝上放置在蛋盘上,照检后画出气室边界和胎位,用75%酒精消毒鸡胚,在气室端钻孔,用注射器吸取200μL处理过的流感核酸检测阳性标本,在鸡胚的羊膜腔和尿囊腔进行接种,接种完成后用蜡或者消毒过的医用胶布封口。放到35℃~37℃的温箱里,培养2~3天。
第三步:病毒收获
到了收获的日期,用75%酒精消毒鸡胚气室端,用无菌镊子撕破鸡胚气室蛋壳。在绒毛尿囊膜无大血管处穿破,然后用无菌吸管通过绒毛尿囊膜进入尿囊腔吸取尿囊液。刺破羊膜,吸取羊水。将收获的病毒培养液置于试管内低温保存。之后进行鉴定,确定流感病毒是否培育成功。
至此,在病毒培养环节,这枚鸡胚的使命就圆满结束了!
江苏高邮蛋鸡科技小院
培养单位:中国农业大学
联合培养单位:高邮市高八度生物科技有限公司
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大家在打流感疫苗前,经常会听到医生问这样一句话:“你对鸡蛋过敏吗?”这疫苗和鸡蛋有什么关系呢?
疫苗作为人类对抗传染性疾病最有利的武器,它的类型有许多,比如说灭活病毒疫苗、重组病毒载体疫苗等等。鸡蛋,实验室里我们称它为鸡胚,利用鸡胚进行病毒培养就是一种经典的灭活病毒疫苗的生产方式。用于病毒培养的鸡胚,跟市面上用于食用的鸡蛋是不太一样的,它必须是无菌的、完好的、未感染特定病原体的受精鸡胚。
为什么选择鸡胚去进行病毒培养呢?这是因为病毒因其自身特点,必须在活细胞内才能生长和增殖。而鸡胚正处于生长发育阶段,细胞代谢旺盛,对一些常见的病毒很敏感,有利于病毒的培养。今天,我们就以流感病毒培养为例,跟大家聊聊我们在实验室里如何通过鸡胚完成病毒的培养。
第一步:选蛋孵化
实验室在收到鸡胚之后,要将鸡胚放置于孵化器中进行孵化,一般孵化9~11天。在整个孵化过程中,要对鸡胚进行观察,弃去死胚、没有受精、有裂痕、发育不全或表面有好多渗水孔的鸡胚,留下血管清晰可见、胎体运动明显的受精鸡胚。
第二步:接种病毒
将符合接种条件的鸡胚气室朝上放置在蛋盘上,照检后画出气室边界和胎位,用75%酒精消毒鸡胚,在气室端钻孔,用注射器吸取200μL处理过的流感核酸检测阳性标本,在鸡胚的羊膜腔和尿囊腔进行接种,接种完成后用蜡或者消毒过的医用胶布封口。放到35℃~37℃的温箱里,培养2~3天。
第三步:病毒收获
到了收获的日期,用75%酒精消毒鸡胚气室端,用无菌镊子撕破鸡胚气室蛋壳。在绒毛尿囊膜无大血管处穿破,然后用无菌吸管通过绒毛尿囊膜进入尿囊腔吸取尿囊液。刺破羊膜,吸取羊水。将收获的病毒培养液置于试管内低温保存。之后进行鉴定,确定流感病毒是否培育成功。
至此,在病毒培养环节,这枚鸡胚的使命就圆满结束了!
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