学生部分日志

• 11

  2023年07月
  CZC涂布

  使用无菌枪头将1个接合菌块刮取至200uL无抗LB液体中，取100uL涂布至含有头孢唑林和氯霉素的CZC琼脂培养基上，28℃过夜培养
• 12

  2023年07月
  筛选

  随机选择2个在CZC培养基上长出较大的菌落划线至含有羧苄青霉素的LBcarb琼脂培养基上28℃过夜培养验证菌株是否正确。发现Pmb1有1个菌落划线无法...
• 13

  2023年07月
  菌落PCR

  使用2种引物进行菌落PCR验证，图4验证正确，说明均含有更换后的启动子。图5使用AD3CK1敲除盒全长引物进行验证，发现Pmb1在2700bp左右有目...
• 14

  2023年07月
  Crisper-Cas9敲除

  将过夜酶切的质粒再次与gRNA过夜连接后转化涂板，菌落PCR验证后无正确的目的片段（图1），后将酶切的质粒与gRNA在T4连接酶的作用下再次连接，转化...
• 15

  2023年07月
  质谱结果

  SDS-PAGE胶的质谱鉴定结果，经过与中华绒鳌蟹的数据库比对共发现151种蛋白质，对其逐个进行检索，发现9种胞外蛋白，可能是AD1-FLAG发生互作...
• 17

  2023年07月
  氯霉素筛选

  将Pmb1和Pmb2的接合子分别在LB和含有氯霉素的LB平板上划线。对在氯霉素上不能生长的在LB平板的对应菌落进行菌落PCR检测
• 18

  2023年07月
  细菌双杂交

  选择过氧凝集素（PX）、脂多糖和β-1,3-葡聚糖结合蛋白（LBGD）和凝集素（CTL）3个蛋白与AD1进行细菌双杂交实验，构建表达质粒前，首先进行引...
• 19

  2023年07月
  参加创新培训

  参加创新培训，学习创新的思路与方法
• 20

  2023年07月
  转化

  含有Pmb1和Pmb2启动子的敲除盒测序正确，PCR扩增新敲除盒切胶纯化后转入二尖梅奇酵母，分别涂布至140、170和200ug/mLG418的YPD...
• 21

  2023年07月
  AD1扩增

  因使用二尖梅奇酵母基因组提取AD1无法切胶回收，因此尝试提取二尖梅奇酵母RNA后获得cDNA,PCR后发现AD1的含量很低，最后选择以前构建的含有AD...